VDRL - USR
Antígeno de cardiolipina para investigar reaginas de la sífilis en Suero sin inactivar, en Plasma y L. C. R. (no requiere reconstitución)
Introducción
Treponema pallidum, la bacteria que causa la sífilis, una enfermedad que generalmente se transmite por vía sexual.
1. Tipo “cardiolipina”.- No treponema e inespecíficos
2. Antitreponemas específicos
La prueba realizada Venereal Disease Research Laboratoy VDRL se le conoce como una prueba para sífilis no-treponemica. Es parte de la exploración inicial de la sífilis e iniciar un tratamiento. Con el método cualitativo empleando la placa presenta floculación, si se presenta el caso se lleva a cabo el método cuantitativo con el o los sueros positivos.
También se emplea en el cuidado prenatal del embarazo, así como parte de los estudios de laboratorio prenatales.
Material
§ Placa cóncava
§ Puntillas
§ Aguja No. 21 sin bisel
§ Cronómetro
Equipo
§ Pipeta semiautomática
§ Microscopio
Muestra
§ Suero
(Obtener 3 ml. de sangre por punción venosa, centrifugar y separar el suero)
Reactivo
§ Antígeno VDRL y los Sueros de Controles (almacenados 2-8°C)
Resultado e interpretación
Resultado e interpretación
Método cualitativo
1.
2. En otro anillo colocar una gota de suero control positivo y en el anillo siguiente una gota
de suero control negativo, extendiendo dentro de los mismos.
3.Añadir una gota del antígeno en suspensión previamente resuspendido en cada muestra
con la aguja N.21
4. Colocar la placa sobre un agitador mecánico a 180 rpm durante 4 min.
(Nota: lo realizamos de forma manual a falta de agitador).
Las pruebas que se realizan en un clima extremadamente seco pueden evaporarse, por lo tanto
la paca se cubre con la tapa de una caja Petri humedecida.
1.
2. En otro anillo colocar una gota de suero control positivo y en el anillo siguiente una gota
de suero control negativo, extendiendo dentro de los mismos.
3.Añadir una gota del antígeno en suspensión previamente resuspendido en cada muestra
con la aguja N.21
4. Colocar la placa sobre un agitador mecánico a 180 rpm durante 4 min.
(Nota: lo realizamos de forma manual a falta de agitador).
Las pruebas que se realizan en un clima extremadamente seco pueden evaporarse, por lo tanto
la paca se cubre con la tapa de una caja Petri humedecida.
Valores de referencia | |||
Paciente 1 | Negativo | CONTROL POSITIVO Presencia de floculación mediana o grande | |
Paciente 2 | Negativo | CONTROL NEGATIVO Ausencia de floculación |
En este caso ambos resultados son negativos lo que indica que ningún paciente tiene sífilis.
El examen con resultado positivo puede indicar que usted tiene sífilis. Si el examen es positivo, el siguiente paso es confirmar los resultados con examen FTA-ABS, que es un examen más específico para la sífilis.
La capacidad del examen VDRL para detectar sífilis depende de la etapa de la enfermedad. La sensibilidad del examen para detectar la sífilis se acerca al 100% durante las etapas intermedias y es menos sensible durante las etapas más tempranas y tardías.
Las siguientes afecciones pueden provocar un examen falso positivo, como:
· VIH
· Enfermedad de Lyme
· Ciertos tipos de neumonía
· Malaria
· Lupus eritematoso sistémico
El siguiente método lo incluí sin embargo por falta de sueros problema positivos en el método cualitativo no se realizó.
Método cuantitativo
1.Seleccionar los sueros positivos obtenidos en la prueba cualitativa.
2.Colocar en una gradilla 6 tubos y numerarlos.
3.Agregar a cada uno 0.5 ml. de solución salina al 9%.
4.Depositar 0.5 ml. de suero al tubo 1 y mezclar.
5.Pasar 0.5 ml. del tubo 1 al tubo 2 mezclar.
6.Pasar 0.5 ml. del tubo 2 al tubo 3 mezclar
7.Continuar con este proceso hasta el tubo 6.
8.Depositar 0.05 ml. de cada una de las diluciones sobre los diferentes anillos de la placa
cóncava.
cóncava.
9.Añadir una gota del antígeno en suspensión estabilizado (VDRL) utilizando la aguja No.21 sin
bisel a cada dilución.
10. Colocar la placa sobre un agitador mecánico a 180 rpm. Durante 4 min.
11. Leer al microscopio con objetivo seco débil 10x.
bisel a cada dilución.
10. Colocar la placa sobre un agitador mecánico a 180 rpm. Durante 4 min.
11. Leer al microscopio con objetivo seco débil 10x.
Resultados e interpretación
El título del suero problema será la última dilución que presente un resultado positivo. Ejemplo:
Si se presenta floculación hasta el tubo 3 – dilución 1:8, por lo tanto el título será 1:8.
Nota:
1.Sueros extremadamente turbios o hemolizados son insatisfactorios para la prueba.
2.Sueros débiles positivos y fuertes evidencias clínicas de la enfermedad es conveniente
efectuar la prueba cuantitativa, ya que ocasionalmente pueden presentar el fenómeno de
prozona.
3. Si la lectura del resultado no se realiza inmediatamente después de los 4 min. puede secarse
la reacción y dificultad en la interpretación.
4.El antígeno en suspensión debe estar a temperatura ambiente antes de ser utilizado.
Conclusiones
1.Sueros extremadamente turbios o hemolizados son insatisfactorios para la prueba.
2.Sueros débiles positivos y fuertes evidencias clínicas de la enfermedad es conveniente
efectuar la prueba cuantitativa, ya que ocasionalmente pueden presentar el fenómeno de
prozona.
3. Si la lectura del resultado no se realiza inmediatamente después de los 4 min. puede secarse
la reacción y dificultad en la interpretación.
4.El antígeno en suspensión debe estar a temperatura ambiente antes de ser utilizado.
Conclusiones
Esta prueba cualitativa VDRL nos permite identificar a los pacientes con sífilis, enfermedad producida por la bacteria Treponema pallidum; se trata de una prueba rápida y certera que permite el inicio de un tratamiento eficaz evitando que avance y pueda ser controlada satisfactoriamente. En caso de que los resultados sean positivos es necesario comprobar con la Prueba Rápida de Regina (RPR) y examen FTA-ABS, que son aun más exactas.
Referencias
Prueba proporcionada por LICON. Laboratorios Licon, S. A., reactivo.
ROSA DE BENGALA
Antígeno Brucelar Amortiguado para el
Introducción
Es una prueba, basada en la aglutinación como respuesta a la presencia de alguna de las aglutininas de Brucella (abortus, mellitensis y suis). Bacterias causantes de la Brucelosis, organismos virulentos e infecciosos para el hombre que adquiere generalmente por vía mucocutánea, por consumir carne contaminada con la bacteria, abrasiones o cortes en la piel, inhalación de aerosol o contaminación de la conjuntiva; invadiendo el sistema linfático y puede alcanzar a diversos órganos.
Desarrollo
§ Placa cóncava
§ Puntillas
§ Cronómetro
Equipo
§ Pipeta semiautomática
§ Microscopio
Muestra
§ Suero
(Obtener 3 ml. de sangre por punción venosa, centrifugar y separar el suero)
Reactivo
§ Antígeno Rosa de Bengala
§ Control Positivo de Brucella
§ Control Negativo de Brucella
Procedimiento
1. Llevar a temperatura ambiente el reactivo, controles y muestras de suero.
2. Utilizando la pipeta automática adicione 30 μL de la muestra del paciente en un círculo de la placa.
3. Mezcle suavemente el Antígeno Rosa de Bengala hasta que se encuentre totalmente homogéneo, después coloque 30 μL en la placa de prueba, en el mismo circulo donde se coloco la muestra del paciente, mezcle ambas con un aplicador. (Usar un aplicador diferente para cada muestra). Repita este paso para cada muestra de paciente y controles.
4. Agitar la placa con movimientos rotatorios por 4 minutos.
5. Con la ayuda de una fuente de luz directa lea el resultado.
Nota : Después de este tiempo(4 min.) la lectura ya no es válida.
Resultado e interpretación
La lectura debe llevarse a cabo exactamente a los 4 minutos tomados a partir de que se comenzó a mezclar
Es el tiempo límite óptimo para la observación de ciertas aglutininas que se revelan lentamente puesto que se pueden presentar reacciones no específicas.
Valores de referencia | |||
Paciente 1 | Negativo | CONTROL POSITIVO Presencia de aglutinación indica la existencia de anticuerpos específicos. | |
Paciente 2 | Negativo | CONTROL NEGATIVO Ausencia de aglutinación. |
Ambos resultados fueron negativos lo que indica que los pacientes no tienes Brucelosis o no han estado en contacto con la bacteria indicada.
Se pueden presentar falsos negativos, que se limitan a enfermos con procesos de pocos días de evolución y a algunos casos de enfermedad de curso muy prolongado.
NOTA: El aislamiento del agente etiológico mediante hemocultivos es de suma importancia.
Conclusiones
Esta prueba cualitativa de Rosa de Bengala es un método considerado eficaz en el diagnóstico de brucelosis, que permite dar al paciente un tratamiento en caso de que sea positivo el resultado, sin embargo por tratarse de una prueba cualitativa se debe comprobar con algunas otras como: Aglutinación Lenta Estándar o Aglutinación Lenta en Presencia de 2-Mercaptoetanol.
Referencias
